绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与中浓度相似的营养物质。zui广泛应用的培养基是的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂。MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学zui通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基――DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足。例如,有些培养基在氨基酸中包括有,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。 F12中含有,据报道也有神经毒效应。
细胞在单纯的基础培养基中不能存活,在特殊类型的淋巴细胞培养基中必须提供某些痕量营养物质及生长因子才能使细胞得以生长并维持生长状态。基础培养基常常要添加血清,血清终浓度多为5~20%。特殊用途的血清来源须用经验确定,广泛应用的血清种类有马血清与胎牛血清。胎牛血清中富含有丝分裂因子,常选其作增殖细胞用的血清,也用于细胞系和原代培养。而马血清常常用来作有丝分裂后的神经元培养。然而,很多人也将胎牛血清用于神经元培养,也有人用马血清来培养胶质细胞。用大鼠进行神经元培养的某些研究者喜欢使用同型血清;人类的胎盘血清,亦曾用于神经组织的器官类型的培养,也用在一些特殊培养种类中。
的不同批号含有不同的成分,所以许多人发现,应该在使用前对血清进行测试。大多数试剂商提供样品,所满意的批号即可选用,这样可以一次得到足够一年用量的血清,血清在使用前通常在56℃加热30分钟,这一过程称为灭活。
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