抗Ⅲ抗体Elisa试剂盒?甲状腺冰冻切片操作方法

1. 主要试剂与仪器

0.5%氨水返蓝液、Gill改良苏木精染液、0.5%～1%盐酸乙醇分化液、1%醇溶性伊红染液、甲醇醋酸混合固定液（甲醇50ml、冰醋酸2.5ml）、各梯度乙醇溶液、二甲苯及中性树胶均

2.操作方法

冷冻机温度为-15℃～-18℃。将新鲜活体组织块切成1.5cm×1.5cm×0.3cm大小，速冻，切片厚度为5μm。粗修组织块，然后细修切面，再用戴手套手的大拇指或大鱼际肌在切面上温暖2～3s，动作稍慢而匀速。切片制成后立即放入甲醇醋酸混合固定液固定0.5～1min后水洗，Gill改良苏木精染胞核1～3min后水洗，0.5%～1%盐酸乙醇分化液分化1～2次后水洗，0.5%氨水返蓝2s后水洗，1%醇溶性伊红染胞质10s，逐级梯度乙醇快速脱水，中性树胶封固[1-2]。

3.结果

3.1 取材浸水对组织HE染色效果的影响

组织浸水后镜下出现冰晶及类似气泡样的“黑水珠”，按压不会消失；未浸水组织结构完整，未见上述现象。

3.2 冷冻温度对组织

冷冻温度过低时，镜下出现甲状腺胶质染色不均匀，甚至出现多量大小不一的空泡；温度适宜时，组织结构清晰完整、细胞无明显膨胀、极少有冰晶形成。

3.3 复温对组织

HE染色效果未复温时，镜下显示滤泡与滤泡之间出现收缩裂隙；复温后无收缩裂隙情况出现。

3.4 固定液对组织

固定液中未加冰醋酸时，镜下显示胶质收缩，皱褶形成，胶质与滤泡上皮脱落，出现空晕；加冰醋酸后，组织结构清晰，核着色清楚，核浆对比度好，组织无皱缩现象发生。

3.5 染色对组织

染色不充分时，镜下显示组织色泽偏红，核对比度不强，影响诊断；染色充分后，镜下组织结构清晰完整，核浆红蓝对比鲜明。

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