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小鼠胰岛素(INS)ELISA检测试剂盒检测步骤解析
点击次数:1550 更新时间:2017-02-28

小鼠胰岛素(INS)ELISA检测试剂盒检测步骤解析

从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体50μL,,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
所有孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

试剂盒性能
1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2.灵敏度:zui低检测浓度小于1.0 pg/ml。
3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6.有效期:6个月
7.检测范围:31.2pg/ml-1000pg/ml
免责声明
1.试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或小鼠体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2.严格按照说明书操作,不同批号不可交换使用,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

 

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