技术的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
(1)直接竞争酶标抗原法测抗原
样本中的待测药物和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合,经底物显色后检测,样本中药物含量愈高,结合在固相上的酶标抗原量愈少,zui后的显色也愈浅。
(2)直接竞争酶标抗体法测抗原
样本中的待测药物和固相抗原竞争结合一定量的酶标记抗体,经底物显色后检测,样本中药物含量愈高,结合在固相上的酶标抗体愈少,zui后显色也愈浅。
直接竞争法具体操作步骤如下:
1)抗原(或抗体)的固相化:将特异性抗原(或抗体)与固相载体联结,形成固相抗原(或抗体),洗涤除去未结合的抗原(或抗体)及杂质。
2)加入标准品/样本,再加入酶标抗体(或酶标抗原),保温反应。样本中药物与固相抗原(或酶标抗原)同时竞争与特异性抗体(或固相抗体)结合,形成固相抗原-酶标抗体复合物(或抗体-酶标抗原复合物)。洗涤除去游离物质及吸附在固相载体上结合不紧密的物质。
3)加底物显色,固相上的酶催化底物成为有色产物。通过仪器检测分析,测知样本中抗原的量。
内标无含测 110791-9102 对二甲氨基苯甲醛 100mg
鉴别 110794-200504 土大黄苷 20mg
含量测定 110800-200404 吴茱萸内酯 20mg
含量测定 110803-200605 华蟾酥毒基 20mg
含量测定 110806-200704 30mg
含量测定 110811-200704 血竭素高氯酸盐 20mg
含量测定 110812-200506 10-羟基-2-癸烯酸 50mg
鉴别 110815-200707 牛磺胆酸钠 20mg
含量测定 110816-200507 牛磺钠 20mg
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