相信对于一些新手实验人员来说,实验做得不理想是难免的事。这不,就在昨天下午,我公司就收到一客户的咨询。这位客户说道:“初次用间接法做ELISA实验,做了几次结果都没有显色,原因在哪里呢”
针对问题描述,上海恒远技术员分析出为何间接ELISA没有显色,可能原因有这几个方面:
1.包被原:包括你的包被液有无问题,有没有配错。包被原一般加100微升,37度2小时;
2.封闭:封闭液用的是否适合?你说做了几次都没显色,空白孔也不显吗?如果空白也无颜 色,那封闭就没有问题。一般封闭是200微升每孔,也可以满孔封闭
3.一抗:检查你的一抗是否失效。是否是在37度反应
4.二抗:底物,底物缓冲液……这些都要好好检查!
5.洗涤:用PBST洗涤,包被和封闭时洗板3次;一抗二抗洗涤5次,每次间隔3分钟。手工和机器洗涤没什么不同,就是省力一些。洗5次不会有负影响,在一抗和二抗洗涤过程中,恰恰需要多洗几次,这样有助于减少非特异性吸附。
做任何实验,都不可能**,尊龙凯时能做的就是尽zui大的努力减少实验误差。
GSK-3 Beta (CT) 内皮脂肪酶
GSK-3 Beta (NT) 内皮因子12受体抗体
GST tag/GSTM1 内皮抑素/内皮他丁抗体
GSTA3 内皮细胞特异性分子1抗体
GSTO1/glutathione S transferase Omega 1 内皮细胞受体蛋白激酶抗体
GstP1/GST class-pi 内皮细胞凝集素HL1抗体
GTP cyclohydrolase 1/GTP-CH-1 内皮细胞的分化蛋白6抗体
GTPBP10/Claudin12 内皮素转化酶2抗体
GTSE-1 内皮素转化酶1抗体
GYG1 内皮素受体B抗体
GYG2 内皮素受体A抗体
GZMA 内皮素-1抗体(抗血清)