反应步骤：

（1）严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30～60min。
（2）加样后及时放人孵箱。标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。
（3）封板温育时，各孔一定要封严，防止阳性标本的液体蒸发，产生周边现象从而导致“花板"的出现。 
（4）用洗板机洗板时，保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干：还要防止针口有纤维蛋白或异物，ELISA试剂盒这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板"的出现。
（5）合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。
（6）加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
（7）显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
（8）加样时保持显色剂不外流；A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。
（9）应保证酶标板清洁，整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至低限度。ELISA试剂盒豚鼠从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。

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