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实时荧光定量pcr试剂盒检验方法的局限性分析
点击次数：759 更新时间：2021-08-19
实时荧光定量pcr试剂盒在分子生物学研究的应用：
1、核酸定量分析。对传染性疾病进行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的检测,比如近期流行的甲型H1N1流感，转基因动植物基因拷贝数的检测，RNA基因失活率的检测等。
2、检测单核苷酸多态性对于研究个体对不同疾病的易感性或者个体对特定药物的不同反应有着重要的意义，因分子信标结构的巧妙性，一旦SNP的序列信息是已知的，采用这种技术进行高通量的SNP检测将会变得简单而准确。
3、基因表达差异分析。比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异(如药物处理、物理处理、化学处理等)，特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA芯片或差显结果的确证。
实时荧光定量pcr试剂盒检验方法的局限性：
被检样本在采集、运输、储存以及处理过程中操作方式不当容易造成RNA降解而产生假阴性结果。
当检测样本中被检核酸浓度低于本试剂盒的低检出*可能会发生假阴性的结果。
样本在采集、运输、储存以及处理过程中发生交叉污染，则容易得到假阳性结果。
实时荧光定量pcr试剂盒注意事项：
试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
试剂盒内所配阴性和阳性对照在次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
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