方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定.在Elisa测定中影响因素较多,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果.引起ELISA测定错误结果的原因主要有:标本因素;试剂因素;操作因素.
1.样品稀释
一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定,以保证试验的灵敏度和特异性.酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应,如果血清不稀释,不可避免会产生很强的非特异性反应,出现假阳性.
2.试剂盒平衡
Elisa中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温(约25℃),一般需在室温放置20~30分钟以上.平衡时间太短会造成试剂混匀不够,样品孵育时间相对缩短,ELISA反应不够充分.冬季室温低,可将试剂盒置37℃温箱20分钟.
3.样品和试剂的混匀
在稀释前、后的样品必须充分混匀,所有试剂在加样前也须摇匀,以保证试验的均一性.
4.加样
加样是一项很重要的步骤.加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡.加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性.加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附.
5.温育
温育是测定中影响测定成败zui为关键的一个因素.ELISA作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原*结合,必须在一定的温度条件下反应一定的时间.
Guanfacine Hydrochloride 盐酸胍法辛标准品 29110-48-3 125mg
Glipizide 美比达标准品 29094-61-9 125mg
Loxapine Succinate 丁二酸洛沙平标准品 27833-64-3 125mg
Articaine Hydrochloride 标准品 23964-57-0 125mg
Nifedipine 标准品 21829-25-4 125mg
Levamisole Hydrochloride 标准品 16595-80-5 125mg
Fluphenazine Hydrochloride 盐酸氟标准品 146-56-5 125mg
Naratriptan Hydrochloride 盐酸那拉曲坦标准品 143388-64-1 125mg
标准品 1397-89-3 125mg
Ursodiol 标准品 128-13-2 125mg
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