产品名称:中间葡萄球菌LAMP试剂盒
产品特点:中间葡萄球菌LAMP试剂盒上海尊龙凯时生物相关产品:4-硝吲唑:163.134- nitroindazole:2942-40-7 C7H5N3O22-氯-4-硝吡氮氧物:158.542- -4- nitro pyridine nitrogen oxide:14432-16-7 C5H3ClN2O22--5-溴-4-甲吡:187.042- amino -5- -4-:98
产品型号:50次
更新日期:2021-03-03
访问次数:456
50次中间葡萄球菌LAMP试剂盒的详细资料:
参数规格:
产品名称 | 中间葡萄球菌LAMP试剂盒 |
英文名称 | Lamp kit for Staphylococcus intermedia |
规格 | 50次 |
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
:531.43Tong Kangzuo:65277-42-1 C26H28Cl2N4O4
1-丁-4-甲氯吡鎓:185.71- butyl -4- methyl pyridinium chloride:112400-86-9 C10H16ClN
漆黄素Lacquer:286.24C15H10O6:528-48-3
2-甲氧-4-三氟甲氧溴:2- methoxy -4- methoxy - three fluorine:
4-硝吲唑:163.134- nitroindazole:2942-40-7 C7H5N3O2
2-氯-4-硝吡氮氧物:158.542- -4- nitro pyridine nitrogen oxide:14432-16-7 C5H3ClN2O2
2--5-溴-4-甲吡:187.042- amino -5- -4-:98198-48-2 C6H7BrN2
1,3-二亚胺异吲哚:145.171,3- two - based:57500-34-2 C8H7N3
醋硝豆素Vinegar nitrate:353.33 C19H15NO6:152-72-7
中间葡萄球菌LAMP试剂盒人 CYP39A1 基因全长ORF克隆
人 CNTN3 基因全长ORF克隆
重组大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, Fc 标签)
人 SKP2 基因全长ORF克隆
小鼠 CXCL3 基因全长ORF克隆
大鼠 FAM45A 基因全长ORF克隆
人 EphrinB2 / EFNB2 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人 Spp1 转录变体1 基因全长ORF克隆
食蟹猴 IFNA2 基因全长ORF克隆
大鼠 SLC3A2 基因全长ORF克隆
大鼠 CCL3 基因全长ORF克隆
人 ENPP5 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
如果你对50次中间葡萄球菌LAMP试剂盒感兴趣,想了解更详细的产品信息,填写下表直接与厂家联系: |