产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断
商品属性：

产品英文名称：Nuclei Extraction Kit (High Purity)

产品中文名称：细胞核分离提取试剂盒（高纯度）

规格：20 T/100 T

货号：EY-01X8552
用途：仅供科研研究实验

特点&优势:

•  从哺乳动物细胞和组织中，快速分离提取纯的脆弱的细胞核

•  通过稠密的蔗糖垫层进行超速离心，以保护细胞核并去除细胞膜和细胞质污染物。

保存建议:请参阅说明书中各个组分的存储条件。自发货之日起，在推荐温度下至少稳定12个月。

运输条件:蓝冰运输

背景

从细胞核制备提取物通常是许多细胞生物学研究的第一步，例如体外细胞凋亡，细胞转录状态检测和核组分来源（染色质，基因组DNA，组蛋白和核RNA / RNP）。

本产品具有下列特点:

 1.操作简便、快捷。可直接加入到检测平板。在96-孔板中检测时,无需洗涤或收获细胞,免去溶解步骤。

2. 无放射性。不需要配制液闪混合物,也不需要处理废弃物。

3. 与MTT相比,使用更安全。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物。

4. 操作灵活,与MTT不同,平板读数后可放回温箱继续孵育,使颜色进一步生成。
公司正在出售的产品：

ADAMTS7 peptide 整合素样金属蛋白酶与1型-7抗原 0.5mgADAMTS7 peptide 整合素样金属蛋白酶与1型-7抗原

FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 标签)

FCGR4重组小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 标签), Biotinylated Protein

EPCAM Protein Rat 重组大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (His 标签)

WWP2重组人 WWP2 蛋白 (His & GST 标签) Protein

小鼠肝细胞生长因子受体(HGFR/ c-MET)检测试剂盒

Human varicella zoster virus IgG (VZV-IgG) ELISA Kit 人水痘带状疱疹病毒IgG(VZV-IgG)检测试剂盒

HumanAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit 人抗Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)检测试剂盒 进口分装

Humanai-ophoblastaibody,ATA检测试剂盒人抗滋养膜细胞抗体(ATA)检测试剂盒

植物氧化应激活性氧(ROS)比色法定量检测试剂盒(超氧阴离子)20次

Humanansferfactor，TFELISAKit人转移因子(TF)检测试剂盒

小鼠25羟基D3(25(OH)D3/25HVD3)检测试剂盒     试剂盒   组装/原装

小鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)检测试剂盒     试剂盒   组装/原装

小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)检测试剂盒     试剂盒   组装/原装

小鼠Ⅰ型胶原N末端肽(X)检测试剂盒     试剂盒   组装/原装

大鼠胎球蛋白B(FETUB)检测试剂盒 ，英文名： FETUB ELISA Kit

Mouse glucocoicoid receptor beta (GR- beta) ELISA Kit 小鼠糖皮质激素受体β(GR-β)检测试剂盒

RatCalcitonin,CTELISAKit 大鼠降钙素(CT)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforHLA-A(HumanleukocyteaigenA)ELISAKit人类白细胞抗原A

细胞PKG-Iβ激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitBF大鼠B因子

细胞核分离提取试剂盒（高纯度）MAPK1重组小鼠 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 蛋白 (His & GST 标签) Protein

促肾上皮质激素释放激素(CRH)重组蛋白 Recombinant Corticotropin Releasing Hormone (CRH)

GUCA1A重组人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白 Protein

FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 标签)

TNFRSF14 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 HVEM / TNFRSF14 蛋白

操作步骤：

(一)获得目的基因

1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。

2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。

(二)构建重组表达载体

1、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。

2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。

(三)  获得含重组表达质粒的表达菌种

1、 将连接产物转化大肠杆菌DH5α,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。

2、 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。

3、 以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。

(四)诱导表达

1、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。

2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。

3、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr。

4、分别取菌体1ml, 离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀, 70℃10min。

5、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析。