产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断
商品属性：

产品英文名称：DiR (DiIC18(7))

产品中文名称：DiR (DiIC18(7))

规格：5mg

货号：EY-01X8572
用途：仅供科研研究实验

特点&优势:

•  λEX/λEm: 748/780 nm(MeOH)。

产品形式深蓝绿色油状固体

使用中注意事项•  可溶于DMSO、DMF和乙醇。

保存建议:-20℃，避光保存12个月。

运输条件:蓝冰运输

背景

DIR是一个亲脂性、近红外荧光花青染料。这个染料常用于标记细胞质膜。两个18-碳链插入到细胞膜，从而特定的、稳定的细胞染色，几乎不会发生细胞间的染料转移。可以用乙醇配置其储存液。细胞染色通常使用的浓度时1-10uM，孵育10-20分钟的。

本产品具有下列特点:

 1.操作简便、快捷。可直接加入到检测平板。在96-孔板中检测时,无需洗涤或收获细胞,免去溶解步骤。

2. 无放射性。不需要配制液闪混合物,也不需要处理废弃物。

3. 与MTT相比,使用更安全。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物。

4. 操作灵活,与MTT不同,平板读数后可放回温箱继续孵育,使颜色进一步生成。
公司正在出售的产品：

AHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(拟南芥 0.5mgAHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(拟南芥)

CD59 Protein Human 重组人 CD59 蛋白

ACE2重组小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein

CD34 Protein Rat 重组大鼠 CD34 蛋白 (Fc 标签)

MAX重组人 MAX / MYC associated factor X 蛋白 (His & GST 标签) Protein

小鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat stem cell factor / mast cell growth factor (SCF/MGF) ELISA Kit 大鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)检测试剂盒

Humanheparansulfate,HSELISAKit 人硫酸类肝素(HS)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Cheraxquadricarinatuslipovitellin/vitellin,Lv/Vn检测试剂盒红螯光壳螯虾卵黄脂0蛋白/卵黄0蛋白(Lv/Vn)检测试剂盒规格：96T/48T

原生质酵母细胞转化试剂盒20次

MouseIgMELISAKit小鼠IgM检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠血小板反应蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠骨粘连蛋白(ON)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠(FA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠组蛋白H2b(histon-H2b)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠腺苷A1受体(ADORA1)检测试剂盒 ，英文名： ADORA1 ELISA Kit

Pla vitamin C (VC) ELISA Kit 植物C(VC)检测试剂盒

Mousebrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 小鼠脑素/脑尿肽(BNP)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanamyloidbetapeptide1-40,ABeta1-40ELISAKit人β淀粉样蛋白1-40

细胞HCK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitE大鼠雌激素

DiR (DiIC18(7))ACE2重组小鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein

AHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(拟南芥 0.5mgAHA3 peptide 植物蛋白AHA3抗原(拟南芥)

MAX重组人 MAX / MYC associated factor X 蛋白 (His & GST 标签) Protein

CD59 Protein Human 重组人 CD59 蛋白

CD34 Protein Rat 重组大鼠 CD34 蛋白 (Fc 标签)

操作步骤：

(一)获得目的基因

1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。

2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。

(二)构建重组表达载体

1、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。

2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。

(三)  获得含重组表达质粒的表达菌种

1、 将连接产物转化大肠杆菌DH5α,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。

2、 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。

3、 以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。

(四)诱导表达

1、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。

2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。

3、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr。

4、分别取菌体1ml, 离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀, 70℃10min。

5、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析。