细胞简介：

大鼠下腔静脉内皮分离自下腔静脉组织；下腔静脉是体内大的静脉，收集下肢、盆部和腹部的静脉血。下腔静脉由左、右髂总静脉汇合而成，汇合部位多在第5腰椎水平，少数平第4腰椎。下腔静脉位于脊柱的右前方，沿腹主动脉的右侧上行，经肝的腔静脉沟、穿 膈的腔静脉孔，开口于右心房。下腔静脉的前面有肝、胰头、十二指肠水平部、右睾丸动脉及小肠系膜根越过。后面为有膈脚、第1～4腰椎、有腰交感干和腹主动脉的壁支。右侧与 腰大肌、右肾、右肾上腺相邻，左侧为腹主动脉。下腔静脉的属支有髂总静脉、右睾丸静脉、肾静脉、右肾上腺静脉、肝静脉、膈下静脉和腰静脉，其中大部分 属支与同名动脉伴行。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠下腔静脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠下腔静脉内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

大鼠大内皮素(Big ET)检测试剂盒 ，英文名： Big ET ELISA Kit

Porcine adiponectin (ADP) ELISA Kit 猪脂联素(ADP)检测试剂盒

ELISA 小鼠白蛋白(mouse Albumin)  进口分装

CLIAKitforLN(HumanLaminin)ELISAKIT人层连蛋白/板层素

通用型DNA平滑末端连接克隆试剂盒10次

ELISAKitβ-lactamase鸡β内酰胺酶

COLEC10重组小鼠 COLEC10 蛋白 (Fc 标签) Protein

基质金属蛋白酶13(MMP13)重组蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)

FASLG重组人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白 Protein

CD40LG Protein Human 重组人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白

ACVR1 Protein Canine 重组狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (Fc 标签)

基质金属蛋白酶13(MMP13)重组蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)

CD40LG Protein Human 重组人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白

COLEC10重组小鼠 COLEC10 蛋白 (Fc 标签) Protein

ACVR1 Protein Canine 重组狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (Fc 标签)

FASLG重组人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白 Protein

小鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human rheumatoid factor (RF) ELISA Kit 人类风湿因子(RF)检测试剂盒

Humancholyglycine,CGELISAKit 人甘胆酸(CG)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

associatedproteinA,SP-A检测试剂盒大鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)检测试剂盒规格：96T/48T

游离脂肪酸化学比色法定量检测试剂盒50次

MouseiactParathormone,i-PTHELISAKit小鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)检测试剂盒规格：96T/48T

大鼠下腔静脉内皮细胞小鼠合成酶检测试剂盒   小鼠合成酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠合成酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠合成酶试剂盒、小鼠合成酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠胰淀素检测试剂盒   小鼠胰淀素试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠胰淀素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠胰淀素试剂盒、小鼠胰淀素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠抑制素检测试剂盒   小鼠抑制素试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠抑制素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠抑制素试剂盒、小鼠抑制素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠增殖细胞核抗原检测试剂盒   小鼠增殖细胞核抗原试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠增殖细胞核抗原试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠增殖细胞核抗原试剂盒、小鼠增殖细胞核抗原eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和尊龙凯时联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和尊龙凯时联系，告知细胞的具体情况，以便尊龙凯时的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。