① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：大鼠牙周膜干细胞

英文名称：Rat Periodontal Ligament Stem Cells

组织来源：牙周膜

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

大鼠牙周膜干分离自牙周膜组织；牙周膜（牙周韧带、牙周间隙）是由致密结缔组织所构成。多数纤维排列成束，纤维的一端埋于牙骨质内，另一端则埋于牙槽窝骨壁里，使牙齿固位于牙槽窝内；牙周膜内有神经、血管、淋巴和上皮细胞等。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）来源于胚胎时期的中胚层组织，具有很强的自我复制和多向分化潜能，具有向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞及肌细胞等多种终末细胞定向分化的能力，运用 MSCs来修复软骨损伤具有很好的应用前景，目前已能够从骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等组织以及羊水、脐带、脐带血中分离和制备间充质干细胞。牙周膜干细胞参与了牙周组织的病变、修复及再生过程。现在，利用牙周膜干细胞建立体外模型，已经成为有关员研究牙周组织疾病的重要手段。

实验室分离的大鼠牙周膜干采用胶原酶消化结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的大鼠牙周膜干经CD44免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基：含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3代左右

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠牙周膜干体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

小鼠甲状旁腺激素(PTH)试剂盒   96T/48T

小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)试剂盒   96T/48T

小鼠甲基化酶(Methylase)试剂盒   96T/48T

小鼠己糖激酶(HK)试剂盒   96T/48T

小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human prostatic acid phosphatase (PAP) ELISA Kit 人前列腺酸性0酸酶(PAP)试剂盒

HumanleukocyteaigenG,HLA-GELISAKit 人类白细胞抗原G(HLA-G)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanadrenalcoexaibody,ACA试剂盒人肾上腺皮质抗体(ACA)试剂盒规格：96T/48T

植物a-(a-AMYLASE)活性比色法定量试剂盒20次

Mouseadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit小鼠能a1A受体(ADRA1A)试剂盒规格：96T/48T

THY1重组食蟹猴 CD90 / THY-1 蛋白 Protein

IQGAP1 支架蛋白抗原 0.5mgIQGAP1 支架蛋白抗原

DDOST重组人 DDOST / OST48 蛋白 Protein

DCBLD1 Protein Human 重组人 Discoidin / DCBLD1 蛋白

PDPN Protein Mouse 重组小鼠 Podoplanin / PDPN 蛋白

IQGAP1 支架蛋白抗原 0.5mgIQGAP1 支架蛋白抗原

DCBLD1 Protein Human 重组人 Discoidin / DCBLD1 蛋白

THY1重组食蟹猴 CD90 / THY-1 蛋白 Protein

PDPN Protein Mouse 重组小鼠 Podoplanin / PDPN 蛋白

DDOST重组人 DDOST / OST48 蛋白 Protein

大鼠牙周膜干细胞大鼠重肽神经丝蛋白(NEFH)试剂盒 ，英文名： NEFH ELISA Kit

Mouse perinuclear ai neuophil cytoplasmic aibody (pANCA) ELISA Kit 小鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)试剂盒

MouseBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISAKit 小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanInsulieceptorBeta,ISR-BetaELISAKIT人胰岛素受体β

微型RNA(miRNA)扩增试剂盒20次

ELISAKitMIP-3β大鼠巨噬细胞性蛋白3β

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用