细胞简介：

人前列腺基质分离自前列腺组织；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官；前列腺是不成对的实质性器宫，由腺组织和肌组织构成。前列腺如栗子，底朝上，与膀胱相贴，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面贴耻骨联合，后面依直肠。前列腺腺体的中间有尿道穿过，扼守着尿道上口，所以，前列腺有问题时，排尿先受影响。前列腺是机体非常少有的，具有内、外双重分泌功能的性分泌腺。作为外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是构成精液主要成分；作为内分泌腺，前列腺分泌的激素称为“前列腺素"。常见疾病为良性前列腺增生，在病理学上良性前列腺增生症又称前列腺结节状增生，是前列腺中常见的产生症状的瘤样病变，结节开始发生可能是基质细胞自发逆转至胚胎阶段，其生长潜力可能是基质-上皮之间的相互协同作用所致，终形成前列腺增生。基质细胞是器官中结缔组织细胞，起到为器官中实质细胞提供支持和营养的作用，成纤维细胞、炎症细胞、免疫细胞以及周皮细胞都是常见的基质细胞类型。基质细胞和肿瘤细胞的相互作用在肿瘤细胞的生长过程中具有重要作用。体外培养人前列腺基质细胞对治疗前列腺增生有重要的研究意义。

方法简介：

公司实验室分离的人前列腺基质采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的人前列腺基质经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 贴壁不包被

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE/ADAM17)ELISA 试剂盒

Human ue insulin (TI) ELISA Kit 人真胰岛素(TI)检测试剂盒

HumanHeatShockProtein20,HSP-20ELISAKit 人热休克蛋白20(HSP-20)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanhiston-H2b检测试剂盒人组蛋白H2b(histon-H2b)检测试剂盒规格：96T/48T

组织环氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性比色法定量检测试剂盒20次

Humanlowdensitylipoprotein，LDLELISAKit人低密度脂蛋白(LDL)检测试剂盒规格：96T/48T

CHEK1重组小鼠 CHK1 / CHEK1 蛋白 (His & GST 标签) Protein

钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱγ(CAMK2γ)重组蛋白 Recombinant Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Gamma (CAMK2g)

BCL2L12重组人 BCL2L12 / BCL2-like 12 蛋白 (GST 标签) Protein

IRAK4 Protein Human 重组人 IRAK4 / IRAK-4 蛋白

CXCL12 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (Fc 标签)

T-细胞可诱导共刺激分子(ICOS)重组蛋白 Recombinant Inducible T-Cell Co Stimulator (ICOS)

IRAK4 Protein Human 重组人 IRAK4 / IRAK-4 蛋白

LIF重组小鼠 LIF 蛋白 (Fc 标签) Protein

CD2 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD2 蛋白 (Fc 标签)

GABARAPL1重组人 ATG8 / GABARAPL1 蛋白 Protein

豚鼠白介素4(IL-4)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human cytochrome P450c21A/21- hydroxylase (CYP21A) ELISA Kit 人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)检测试剂盒

HumanMousemyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 人髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumancyclophilinB,CyPB检测试剂盒人嗜环蛋白/亲环素B(CyPB)检测试剂盒规格：96T/48T

组织HCK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit人抗副流感病毒IgG抗体(ai-PIVIgG)检测试剂盒规格：96T/48T

人前列腺基质细胞人粘蛋白6(MUC6)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human MUC6 (Mucin 6) ELISA Kit

人肌球蛋白结合蛋白C(MYBPC3)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human MYBPC3 (Myosin Binding Protein C, Cardiac) ELISA Kit

人肌球蛋白重链10(MYH10)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human MYH10 (Myosin Heavy Chain 10, Non Muscle) ELISA Kit

人肌球蛋白重链9(MYH9)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human MYH9 (Myosin Heavy Chain 9, Non Muscle) ELISA Kit

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和尊龙凯时联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和尊龙凯时联系，告知细胞的具体情况，以便尊龙凯时的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。