① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：兔脊髓神经元细胞

英文名称：Rabbit Spinal Cord Neuron Cells

组织来源：脊髓组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔脊髓神经元分离自脊髓组织；脊髓是细细的管束状的神经结构，位于脊柱的椎管内且被脊椎保护；是源自脑的中枢神经系统延伸部分。中枢神经系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的神经信息。人和脊椎动物中枢神经系统的一部分，在椎管里面，上端连接延髓，两旁发出成对的神经，分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形(蝴蝶型)灰质区，主要由神经细胞构成；在灰质区周围为白质区，主要由有髓神经纤维组成；脊髓是许多简单反射的中枢。脊髓两旁发出许多成对的神经(称为脊神经)分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。脊髓是周围神经与脑之间的通路，也是许多简单反射活动的低级中枢。按脊神经的出入可把脊髓也分为相应的31节，31对脊神经就是由不同的脊椎发出的。神经系统基本的结构和功能单位是神经元，即神经细胞，其大小和外观在中枢神经系统中差异很大。但都具有胞体和树突、轴突。胞体又叫核周体，内含神经丝、微管、内质网、游离核糖体和一个有明显核仁的核。一些大神经元突起的粗面内质网可用Nissl染色显示，在光镜下是灰蓝色斑块状，称为尼氏小体。树突和轴突是神经元的突起，能在神经元之间传递电冲动，突起的大小和形态各不相同，很难用常规的显微镜鉴别。脊髓组织内含有大量胶质细胞，神经元含量少，分离纯化难度大，且脊髓神经元细胞是高度分化的终末细胞，不能分裂增殖，培养要求高。刚接种的脊髓神经元呈圆形，体积小，透亮，无突起。培养2-3d，可见胞体增大，突起增多延长；培养6-7d，细胞体大饱满，突起明显增加延长并交织成网，光晕明显，立体感强。培养20d后，死亡细胞明显增加，细胞出现内空泡，突起粗细不均，甚至脱壁，发生细胞崩解。

公司实验室分离的兔脊髓神经元采用胶原酶&联合消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的兔脊髓神经元经β-Tubulin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 神经元细胞样

传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

小鼠IP-10(mouse IP-10)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠8异前列腺素(mouse 8-iso-PG)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠白三烯B4(mouse LTB4)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠瘦素(mouse Leptin)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠骨碱性0酸酶(BALP)试剂盒

Human growth hormone releasing peptide (GHRP) ELISA Kit 人生长激素释放多肽(GHRP)试剂盒

Humangasicinhibitorypolypeptide,GIPELISAKit 人胃抑素(GIP)试剂盒 进口分装

Humanai-ribonucleoproteinAibody,RNP-Ab试剂盒人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)试剂盒

植物细胞原生质体化学转染试剂盒10次

HumaumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISAKit人坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)试剂盒

NRG1重组狗 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 标签) Protein

NOS-1(bNOS:neuronal NOS:nNOS:Nitric Oxide synthase-1 0.5mgNOS-1(bNOS:neuronal NOS:nNOS:Nitric Oxide synthase-1) 合成酶-1(抗原)

SMOC1重组人 SMOC1 蛋白 (His 标签) Protein

FAM3C Protein Human 重组人 FAM3C / ILEI 蛋白

CES1D Protein Mouse 重组小鼠 CES3 / Carboxylesterase-3 / CES1D 蛋白 (His 标签)

NOS-1(bNOS:neuronal NOS:nNOS:Nitric Oxide synthase-1 0.5mgNOS-1(bNOS:neuronal NOS:nNOS:Nitric Oxide synthase-1) 合成酶-1(抗原)

FAM3C Protein Human 重组人 FAM3C / ILEI 蛋白

NRG1重组狗 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 标签) Protein

CES1D Protein Mouse 重组小鼠 CES3 / Carboxylesterase-3 / CES1D 蛋白 (His 标签)

SMOC1重组人 SMOC1 蛋白 (His 标签) Protein

兔脊髓神经元细胞大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)试剂盒 ，英文名： GMCSF ELISA Kit

Mouse Helicobacter pylori IgG (Hp-IgG) ELISA Kit 小鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)试剂盒

RatPeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISAKit 大鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)试剂盒 进口分装

CLIAKitforGAG(Humanglycosaminoglycan)ELISAKit人糖胺聚糖试剂盒

细胞果糖-1,6-二0酸缩酶(ALD)定量试剂盒20次

RatProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit大鼠前列腺素E2(PGE2)试剂盒

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用