细胞简介：

兔肾脏微血管内皮分离自肾脏；肾脏是兔的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水分及其他有用物质，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能，生成肾素、促红细胞生成素、活性3、前列腺素、激肽等，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行。肾脏内部的结构，可分为肾实质和肾盂两部分。在肾纵切面可以看到，肾实质分内外两层：外层为皮质，内层为髓质。肾皮质位于肾实质表层，富含血管，新鲜时呈红褐色，由一百多万个肾单位组成。每个肾单位由肾小体和肾小管所构成，部分皮质伸展至髓质锥体间，成为肾柱。肾髓质位于肾皮质的深面，血管较少，色淡红，为10-20个锥体所构成。肾锥体在切面上呈三角形。锥体底部向肾凸面，向肾门，锥体主要组织为集合管，锥体称肾乳头，每一个乳头有10-20个乳头管，向肾小盏漏斗部开口。在肾窦内有肾小盏，为漏斗形的膜状小管，围绕肾乳头。肾锥体与肾小盏相连接。每肾有7-8个肾小盏，相邻2-3个肾小盏合成一个肾大盏。每肾有2-3个肾大盏，肾大盏汇合成扁漏斗状的肾盂。肾盂出肾门后逐渐缩窄变细，移行为输尿管。肾单位是肾脏结构和功能的基本单位。肾小体包括肾小球和肾小囊。肾小体内有一个毛细血管团，称为肾小球，肾小球是个血管球。它由肾动脉分支形成。肾小球外有肾小囊包绕。肾小囊分两层，两层之间有囊腔与肾小管的管腔相通。肾小管汇成集合管。若干集合管汇合成乳头管，尿液由此流入肾小盏。微血管又称毛细血管。分布于各种组织和细胞间的微细的血管。介于微动脉和微静脉之间。平均直径7-9微米，数量极多，成网状分布。管壁由一层内皮细胞及一薄层基膜组成，厚约0.5微米。基膜外面有薄层结缔组织，其中有纤维细胞、巨噬细胞和周细胞等。细的毛细血管由一个内皮细胞围成管腔，较粗的毛细血管由2-3个内皮细胞围成。分布于肌肉组织、神经组织和结缔组织中的毛细血管，内皮细胞间为缝隙连接（缝隙宽150埃），称连续毛细血管；分布于内分泌腺、肾脏等处的毛细血管，除有缝隙连接外，细胞本身有许多小孔，（孔径800-1000埃），称有孔毛细血管；分布于肝、脾、骨髓及某些内分泌腺的毛细血管，管腔扩大，称血窦。毛细血管的管壁薄、通透性大、管径细（8-10微米）、数量多、血流速度慢，这些特点使其成为血液与组织液进行物质交换的场所，又称交换血管。血窦（sinusoid）由毛细血管管腔扩大而成，窦壁的一般结构与毛细血管壁相同，由单层内皮细胞构成，内皮细胞膜上有窗孔。不同器官的窦壁结构各有差别。脾血窦的内皮细胞间有较宽裂隙；肝血窦内皮细胞是不连续的，有较宽的细胞隙（0.1-0.5微米）；肝、脾血窦的基膜不完整或无基膜，通透性比毛细血管大，较大的蛋白质和血细胞可以通过。肝血窦壁内有枯否细胞，脾血窦内外有巨噬细胞，这两种细胞都有吞噬能力，可吞噬清除血液中的异物、细菌等有害物质，是机体单核巨噬细胞系统的重要组成分。某些内分泌腺的血窦有连续的基膜。

方法简介：

实验室分离的兔肾脏微血管内皮采用胶原酶消化，结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔肾脏微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件：PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基：含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔肾脏微血管内皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

豚鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)检测试剂盒 ，英文名： IL1Ra ELISA Kit

Human ubiquitin activating enzyme (E1/UBAE) ELISA Kit 人泛素激活酶(E1/UBAE)检测试剂盒

rabbitIerleukin4,IL-4ELISAKit 兔子白介素4(IL-4)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBeta-CG(MouseChorionicGonadoophinBeta)ELISAKit小鼠绒毛膜β

细菌乙醇比色法定量检测试剂盒20次

Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit兔子神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)检测试剂盒规格：96T/48T

CXCL16重组狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 标签) Protein

NPY ( Neuropeptide Y 0.5mgNPY ( Neuropeptide Y)1-36 神经肽 Y(1-36多肽)

CNDP2重组人 CNDP2 / CPGL / PEPA 蛋白 Protein

IL6ST Protein Human 重组人 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白

TSPAN7 Protein Mouse 重组小鼠 TALLA-1 / TSPAN7 蛋白

NPY ( Neuropeptide Y 0.5mgNPY ( Neuropeptide Y)1-36 神经肽 Y(1-36多肽)

IL6ST Protein Human 重组人 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白

CXCL16重组狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 标签) Protein

TSPAN7 Protein Mouse 重组小鼠 TALLA-1 / TSPAN7 蛋白

CNDP2重组人 CNDP2 / CPGL / PEPA 蛋白 Protein

豚鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human surface membrane immunoglobulin (SmIg) ELISA Kit 人细胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)检测试剂盒

HumanhistoneH2A-H2B-DNAaoaibodyELISAKit 人抗组蛋白(H2A-H2B)-DNA抗体/抗二聚体-DNA抗体检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanCyclin-dependekinase2,CDK-2检测试剂盒人周期素依赖性激酶2(CDK-2)检测试剂盒规格：96T/48T

组织GRK4激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

Humanprealbumin，PAELISAKit人前白蛋白(PA)检测试剂盒规格：96T/48T

兔肾脏微血管内皮细胞人脂肪型脂肪酸结合蛋白试剂盒检测试剂盒   人脂肪型脂肪酸结合蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   人脂肪型脂肪酸结合蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：人脂肪型脂肪酸结合蛋白试剂盒、人脂肪型脂肪酸结合蛋白试剂盒检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

人细胞外基质0酸糖蛋白检测试剂盒   人细胞外基质0酸糖蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   人细胞外基质0酸糖蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：人细胞外基质0酸糖蛋白试剂盒、人细胞外基质0酸糖蛋白检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

人髓样分化因子初次应答基因88检测试剂盒   人髓样分化因子初次应答基因88试剂盒   规格型号：96T/48T   人髓样分化因子初次应答基因88试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：人髓样分化因子初次应答基因88试剂盒、人髓样分化因子初次应答基因88 检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

人丝酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G检测试剂盒   人丝酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G试剂盒   规格型号：96T/48T   人丝酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：人丝酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G试剂盒、人丝酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G 检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和尊龙凯时联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和尊龙凯时联系，告知细胞的具体情况，以便尊龙凯时的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。