细胞简介：

小鼠卵巢颗粒分离自卵巢组织；卵巢是雌性动物的生殖器官，卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同，仅左侧发育（右侧已退化），呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官，它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、淋巴管和神经。卵巢颗粒细胞是卵巢的主要功能细胞，其增殖与分化直接影响着卵泡的生长启动、发育、排卵、黄体形成以及甾体激素分泌等卵巢功能活动。卵巢颗粒细胞是卵泡内的大细胞群，也是主要的功能细胞，卵泡发育的显著标志之一就是颗粒细胞迅速生长及增殖，而成年动物的卵泡闭锁主要是由颗粒细胞凋亡引起，尤其在卵泡发育后期，此外，颗粒细胞还与卵泡膜细胞共同完成卵巢激素的合成，维持着有利于卵母细胞生长和成熟的微环境。细胞形状呈圆形或椭圆形。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠卵巢颗粒采用先机械分离，而后胶原酶消化，后差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的小鼠卵巢颗粒经FSHR免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

性激素结合球蛋白   英文名称：   Sex Hormone Binding Globulin   规格：      英文缩写：   SHBG

血小板衍生生长因子   英文名称：   Platelet Derived Growth Factor   规格：      英文缩写：   PDGF

胰岛素原   英文名称：   Proinsulin   规格：      英文缩写：   PINS

催乳素   英文名称：   Prolactin   规格：      英文缩写：   PRL

小鼠乙酰(ACH)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human soluble factor related apoptosis ligand (sFASL) ELISA Kit 人可溶性凋亡相关因子配体(sFASL)试剂盒

HumanGlomerulaissueexact-advancedglycosylationendproducts,GTE-AGEELISAKit 人肾小球组织糖基化终末产物(GTE-AGE)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor5-HT(Human5-Hydroxyyptamine)ELISAKit人5羟色胺

饮料氨荧光定量试剂盒20次

MouseMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISAKit小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)试剂盒规格：96T/48T

ERBB2重组人 HER2 / ErbB2 蛋白 (Fc 标签) Protein

尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶1(NOX1)重组蛋白 Recombinant Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1 (NOX1)

KIAA1279重组人 KIAA1279 蛋白 Protein

CCNE1 Protein Human 重组人 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白

NA Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 神经酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)

尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶1(NOX1)重组蛋白 Recombinant Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1 (NOX1)

CCNE1 Protein Human 重组人 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白

ERBB2重组人 HER2 / ErbB2 蛋白 (Fc 标签) Protein

NA Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 神经酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)

KIAA1279重组人 KIAA1279 蛋白 Protein

小鼠卵巢颗粒细胞大鼠干扰素诱导蛋白11(IP-11/CXCL11)试剂盒 ，英文名： IP-11/CXCL11 ELISA Kit

Porcine ierleukin 3 (IL-3) ELISA Kit 猪白介素3(IL-3)试剂盒

超级细菌NDM-1基因核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforMEC/CCL28(Humanmucosaeassociatedepitheliachemokine)ELISAKit人粘膜相关上皮趋化因子

体液葡萄糖氧化酶比色法定量试剂盒20次

ELISAKitsIgA牛分泌型免疫球蛋白A

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和尊龙凯时联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和尊龙凯时联系，告知细胞的具体情况，以便尊龙凯时的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。