① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：小鼠浦肯野细胞

英文名称：Mouse Purkinje cells

组织来源：小脑组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

小鼠浦肯野分离自小脑皮质组织；小脑的表面被覆着一层灰质，叫小脑皮质，小脑皮质分为3层，从表及里分别为分子层、浦肯野细胞层和颗粒细胞层。皮质里含有星状细胞、篮状细胞、浦肯野细胞、高尔基细胞和颗粒细胞等5种神经元。浦肯野细胞发出的轴突组成小脑皮质的传出纤维，终止于小脑白质内的神经核。浦肯野细胞（Purkinje cell）是从小脑皮质发出的能够传出冲动的神经元。人的小脑皮质约有1500万个浦肯野细胞。浦肯野细胞还广泛分布于心室。显著的电生理特点是传导性强，传导速度快，可达4000mm/s。属快反应自律型细胞，具有舒张期自动除极化的性能，因而有自律性，但自律性强度明显低于窦房结P细胞。这类细胞常常平行排列，细胞内电阻低，只有心室细胞的1/3。小脑：浦肯野细胞是小脑皮质中大的神经元，细胞体呈梨形，顶端发出2~3条粗大的主树突，向外伸入分子层。主树突沿途分支繁茂，形如展开的、扁薄的扇形，铺展在与小脑叶片长轴垂直的平面上。树突分支上有大量的树突棘，与传入纤维构成广泛的突触联系，接受传入小脑的全部信息。轴突由细胞底部（与主树突相对方向）发出，细长，离开胞体不远便形成有髓神经纤维，向内经颗粒层离开皮质进入白质，组成小脑皮质的传出纤维，终止于小脑内部的神经核团。一个浦肯野细胞的轴突约形成500个终末膨大，约与小脑深部核团的35个神经元形成突触。心脏浦肯野细胞常常平行排列，几个细胞互相以浆膜连接排成一个小束，小束外包绕着基底膜。细胞内含肌原纤维很少，胞浆区内充满糖原颗粒、线粒体和肌浆网，细胞内电阻低，只有心室细胞的1/3。浦肯野细胞内无横管系统，但膜电容比收缩细胞大，可能是由于其闰盘结构广泛而复杂，提供了较大的表面积的缘故。浦肯野细胞闰盘的主要成分是缝隙连接，粒着膜占的比例很少，这些可能是构成浦肯野细胞传导快的形态学基础。

公司实验室分离的小鼠浦肯野采用消化法结合神经元专用培养基、化学试剂抑制法筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶

质量检测

公司实验室分离的小鼠浦肯野经Neph3免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含脂质浓缩液、BSA、Monothioglycerol、Transferrin、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 神经元细胞样

传代特性 不增殖；不传代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠N-乙酰基-丝酰-天门冬酰-赖酰-脯酸(AcSDKP)检测试剂盒 ，英文名： AcSDKP ELISA Kit

Mouse catecholamine (CA) ELISA Kit 小鼠儿茶酚胺(CA)检测试剂盒

ELISA 小鼠基质金属蛋白酶抑制剂-2(mouse TIMP-2)  进口分装

CLIAKitforIFI16/p16ELISAKit大鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16

通用型比色法定量检测试剂盒20次

ELISAKitGP-MM大鼠糖原0酸化酶同工酶MM

COMP重组人 COMP 蛋白 Protein

膜辅蛋白(MCP)重组蛋白 Recombinant Membrane Cofactor Protein (MCP)

CLCF1重组人 NNT1 / CLCF1 / CLC 蛋白 (Fc 标签) Protein

GBA3 Protein Human 重组人 GBA3 / CBGL1 蛋白

HA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/reassortant/IVR-155) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

膜辅蛋白(MCP)重组蛋白 Recombinant Membrane Cofactor Protein (MCP)

GBA3 Protein Human 重组人 GBA3 / CBGL1 蛋白

COMP重组人 COMP 蛋白 Protein

HA Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/reassortant/IVR-155) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

CLCF1重组人 NNT1 / CLCF1 / CLC 蛋白 (Fc 标签) Protein

小鼠白三烯C4(LTC4)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human hyaluronic acid binding protein (HABP) ELISA Kit 人透明质酸结合蛋白(HABP)检测试剂盒

Humanphospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit 人0酸化细胞外信号调节激酶(pERK)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humancalcineurin,CaN检测试剂盒人钙调0酸酶(CaN)检测试剂盒规格：96T/48T

质谱分析20样本

HumanSolubleprotein-100B，S-100BELISAKit人S100B蛋白(S-100B)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠浦肯野细胞兔子葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子透明质酸(HA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用