① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：小鼠阴道壁成纤维细胞

英文名称：Mouse Vaginal Wall Fibroblast Cells

组织来源：阴道组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

小鼠阴道壁成纤维分离自阴道组织；阴道位于膀胱、尿道和直肠之间，是一个富有弹性的管状器官。它在人类生殖过程中具有多种生理功能，是连接子宫与外阴的通道，是排出月经血、娩出婴儿的必经之路，也是一个重要的性交器官。阴道壁按组织学由外到内分三层，即黏膜层、肌层和外膜。1）黏膜层由上皮和固有膜组成。上皮较厚，为复层鳞状上皮，从基底层到表层由基底层、旁基底层、中间层和表层组成。没有角化层。阴道粘膜的基底层呈细波纹状起伏。2）肌层由平滑肌组织构成，肌束排列不规则，纵行和环形互相交错。肌束间有较多的结缔组织和弹性纤维。阴道外口有环形的横纹肌称括约肌。3）外膜层为纤维膜，由结缔组织构成，内含丰富的弹性纤维、静脉丛、淋巴管和神经。大鼠阴道壁成纤维细胞主要分离自外膜层，成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。

公司实验室分离的小鼠阴道壁成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的小鼠阴道壁成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传2-3代左右；2代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠α2巨球蛋白(α2-MG)检测试剂盒 ，英文名： α2-MG ELISA Kit

Mouse monocyte chemotactic protein 3 (MCP-3/CCL7) ELISA Kit 小鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)检测试剂盒

ELISA 小鼠P53蛋白(mouse P53)  进口分装

CLIAKitforIGFBP-4ELISAKit大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4

通用型牛(BCV)试剂盒20次

ELISAKitPAI大鼠纤溶酶原激活物抑制因子

HA重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/4664T/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

ECD Protein Human 重组人 ECD / Ecdysoneless homolog 蛋白 (His & GST 标签)

TNFSF8 Protein Human 重组人 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 标签)

ECD Protein Human 重组人 ECD / Ecdysoneless homolog 蛋白 (His & GST 标签)

HA重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/4664T/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

TNFSF8 Protein Human 重组人 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 标签)

HAVCR2重组人 TIM-3 / HAVCR2 蛋白 Protein

小鼠抗核抗体(ANA)检测试剂盒 96T/48T

Thrombin receptor (A) ELISA Kit 大鼠抗受体(A)检测试剂盒

Humanai-fibrillarinaibody,AFA/snoRNP/U3RNPELISAKit 人抗核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanangiotensinogen,aGT检测试剂盒人血管紧张素原(aGT)检测试剂盒规格：96T/48T

植物根瘤原生质细胞分离试剂盒5次

Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISAKit人β内酰胺酶抑制剂(BLI)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠阴道壁成纤维细胞小鼠睾   英文名称：   testosterone   规格：      英文缩写：   TESTO

小鼠活化调节趋化因子   英文名称：   thymus and activation regulated chemo-kine   规格：      英文缩写：   TARC

小鼠抗复合物   英文名称：   Thrombin-aithrombin   规格：      英文缩写：   TAT

小鼠组织因子   英文名称：   tissue factor   规格：      英文缩写：   TF

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用