产品名称:小鼠直肠平滑肌细胞
产品特点:小鼠直肠平滑肌细胞公司正在出售的产品杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7B5 原代心肌细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1ml PDE3A Others Human 人 PDE3A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人细胞裂解液 人表皮黑色素细胞-浅色素(HEM
产品型号:
更新日期:2024-12-17
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小鼠直肠平滑肌细胞的详细资料:
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
细胞简介:
小鼠直肠平滑肌分离自直肠组织;直肠为大肠的未段,位于小骨盆内。上端平第3骶椎处接续乙状结肠,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿过盆膈,下端以门而终。直肠上端的大小似结肠,其下端扩大成直肠壶腹,是粪便排出前的暂存部位,下端变细接管。直肠在盆腔内的位置与骶椎腹面关系密切,与骶椎有相同的曲度。直肠周围多脂肪、无纵带,位于膀胱和生殖器官的背侧。直肠平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。直肠的动脉血供主要是来自肠系膜下动脉的直肠上动脉,来自髂内动脉的直肠中动脉和来自髂内动脉的直肠下动脉。平滑肌收缩是胃肠蠕动中基本的运动方式;肠炎时由于平滑肌特殊肌动蛋白的增加导致了平滑肌层的增厚。平滑肌肌动蛋白可能影响收缩力的产生,这进一步证明了炎症时的肠平滑肌细胞具有可塑性。利用肠平滑肌细胞的培养,可以帮助了解收缩、增殖和胃肠道结缔组织对平滑肌细胞的反应。
产品名称 | 小鼠直肠平滑肌细胞 | 组织来源 | 直肠组织 |
英文名称 | Mouse Rectal Smooth Muscle Cells | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
方法简介:
公司实验室分离的小鼠直肠平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的小鼠直肠平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和尊龙凯时联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm离心3 min,弃上清。加5 mL PBS重悬细胞,再900 rpm-1000 rpm离心3 min,,用新鲜的*培养基重悬细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和尊龙凯时联系,告知细胞的具体情况,以便尊龙凯时的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1:2传代 。
9.注意: 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。
公司正在出售的产品:
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP5)检测试剂盒 ,英文名: IGFBP5 ELISA Kit
Mouse endostatin (ES) ELISA Kit 小鼠内皮抑素(ES)检测试剂盒
MouseThrombopoietin,TPOELISAkit 小鼠血小板生成素(TPO)检测试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanCyclin-D2ELISAKit人细胞周期素D2
细胞AURORA-B激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKitBMP-6大鼠骨形成蛋白6
CNTNAP2重组小鼠 CNTNAP2 / CASPR2 蛋白 Protein
ATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide 0.5mgATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide) ATP酶通道蛋白抗原
ENPP2重组人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白 Protein
FGFR4 Protein Human 重组人 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白
IL25 Protein Rat 重组大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 蛋白 (Fc 标签)
ATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide 0.5mgATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide) ATP酶通道蛋白抗原
FGFR4 Protein Human 重组人 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白
CNTNAP2重组小鼠 CNTNAP2 / CASPR2 蛋白 Protein
IL25 Protein Rat 重组大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 蛋白 (Fc 标签)
ENPP2重组人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白 Protein
小鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human peptidylprolyl CIS ans isomerase (PPI) ELISA Kit 人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)检测试剂盒
HumanvonWillebrandFactor,vWFELISAKit 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)检测试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanBcelldifferetiationfactor,BCDF检测试剂盒人B细胞分化因子(BCDF)检测试剂盒规格:96T/48T
植物源性饲料油菜籽(rapeseed)试剂盒20次
Humahrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit人纤溶抑制因子/激活的纤溶抑制物(TAFI)检测试剂盒规格:96T/48T
小鼠直肠平滑肌细胞脱氧核糖核酸酶I 100mg
DNaseI,frombovinepancreas
三0酸脱氧核苷酸混合溶液 10x0.5ml
dPMix,10mMeach(dATP,dCTP,dGTP,dTTP) 100x0.5ml
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