洗涤方法:
1. 自动洗板机:每孔加入洗涤液350μl,注入与吸出间隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩尽孔内液体,在洁净的吸水纸上拍干,每孔加洗涤液350μl,浸泡1-2分钟,吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体,在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。
实验开始前,各试剂均应平衡至室温;试剂或样品配制时,均需充分混匀,并尽量避免起泡。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜,37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制),酶标板加上覆膜,37℃温育1小时。
3.弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约350μl /每孔,甩并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。
干4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl,加上覆膜,37℃温育1小时。
5.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长,但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。
7.每孔加终止液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。
9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。
alpha Actinin 4-Loading Controlα-辅肌动蛋白4(内参)抗体
Alkaline Phosphatase碱性磷酸酶抗体
AU1 tagAU1 tag标签抗体
AEBP1脂肪细胞增强结合蛋白1
AKT1蛋白激酶B
AKT1蛋白激酶B
ANGL2血管生成素样蛋白2抗体
Angiopoietin 4血管生成素3/血管生成素4抗体
Annexin I膜粘连蛋白 I抗体
Annexin A2膜粘连蛋白 Ⅱ抗体
ATF1活化转录因子1抗体
Aquaporin 4 水通道蛋白4抗体
ATF2活化复制因子2抗体
AMPK beta 1腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体
Amylin糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽抗体
Angiotensin II血管紧张素Ⅱ抗体
AT2R血管紧张素Ⅱ受体1抗体
Angiopoietin-1血管生成素-1抗体
Annexin V膜粘连蛋白5抗体
Annexin V重组膜粘连蛋白5抗体
alpha Adaptin衔接蛋白α-Adaptin抗体
APAF1(CT)凋亡蛋白活性因子-1抗体(C端)
APAF1(NT)凋亡蛋白活性因子-1抗体(N端)
ABCG2三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体
APOE载脂蛋白E抗体
Amyloid Precursor Protein淀粉样肽前体蛋白抗体
Aquaporin 2水通道蛋白-2抗体
AGT血管紧张素原抗体
Androgen receptor雄激素受体抗体
AVEN细胞死亡调节蛋白抗体(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制剂)
Axin1轴蛋白1抗体