① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：人小气道平滑肌细胞

英文名称：Human Small Airway Smooth Muscle Cells

组织来源：小气道组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

人小气道平滑肌分离自小气道组织；临床上通常将内径小于2mm的小细支气管称为小气道。小气道具有气流阻力小，但易阻塞的特点。在平静吸气时，空气进入狭窄的鼻咽部，产生涡流。由于小气道已无软骨支持，在脱离纤维鞘嵌入肺组织后，管腔通畅性不象软骨性气道，易于受胸腔的压力变化的影响。小气道上皮细胞形成连续呼吸道内层，作为隔绝外界有害物质的物理和功能屏障发挥着的作用。小气道位于肺泡和气管的交界处，这些细胞在功能上能够调节免疫反应、产生化学因子进行宿主防御、表达粘附分子，并可能通过HLA-DR表达呈递抗原；它们还能产生液体有助于肺液的平衡。许多呼吸道疾病，如哮喘、支气管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纤维化，都涉及呼吸道表面上皮细胞的破坏；小气道上皮细胞的培养可为防止呼吸道扩增疾病和重塑提供新的治疗选择。小气道平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。小气道的生理功能特点：①小气道阻力小；②气流速度慢；③可调节控制通气与血流比例。小气管平滑肌细胞主要功能：①保持气道张力维持小气道形态；②肺小气道进行气体交换，病变可引起换气功能障碍；③炎症、痰液阻塞或当气道外压大于气道内压时容易造成小气道闭合、萎陷。小气管平滑肌细胞与主要病生理变化：①支气管炎；②肺气肿；③慢性阻塞性肺疾病。

公司实验室分离的人小气道平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的人小气道平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠调节转录肽(CA)检测试剂盒 ，英文名： CA ELISA Kit

Monkey macrophage migration inhibitory factor (MIF) ELISA Kit巨噬细胞移动抑制因子(MIF)检测试剂盒

RatCompleme3,C3ELISAKit 大鼠补体蛋白3(C3)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforFSH(mousefollicle-stimulatinghormone)ELISAKit小鼠促卵泡素

细胞还原型(GSH)浓度高效液相色谱定量检测试剂盒50次

RatPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISAKit大鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)检测试剂盒规格：96T/48T

CD53重组小鼠 CD53 蛋白 (aa 107-181, His 标签) Protein

基质金属蛋白酶1(MMP1)重组蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1)

CD81重组人 CD81 / TAPA-1 蛋白 Protein

IGF2BP2 Protein Human 重组人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 标签)

EFNB2 Protein Canine 重组狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白

基质金属蛋白酶1(MMP1)重组蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1)

IGF2BP2 Protein Human 重组人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 标签)

CD53重组小鼠 CD53 蛋白 (aa 107-181, His 标签) Protein

EFNB2 Protein Canine 重组狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白

CD81重组人 CD81 / TAPA-1 蛋白 Protein

豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)检测试剂盒 ，英文名： TGF-β1 ELISA Kit

Human protein kinase A (PKA) ELISA Kit 人蛋白激酶A(PKA)检测试剂盒

MonkeyMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit巨噬细胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBMP-6(MouseBonemorphogeneticprotein6)ELISAKit小鼠骨形成蛋白6

细菌氢铋选择琼脂平板50个

rabbitNeuron-specificenolase,NSEELISAKit兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)检测试剂盒规格：96T/48T

人小气道平滑肌细胞素   英文名称：   Human Renin   规格：      英文缩写：   RN

视网膜母细胞瘤蛋白1   英文名称：   Human Retinoblastoma Protein 1   规格：      英文缩写：   RBP1

松弛素-2   英文名称：   Human Relaxin-2   规格：      英文缩写：   RLN-2

S-100蛋白   英文名称：   S-100protein   规格：      英文缩写：   S-100

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用