细胞简介：

小鼠棕色脂肪分离自棕色脂肪组织；动物体内存在棕色和白色两种脂肪，白色脂肪堆积在皮下，负责储存多余热量；棕色脂肪负责分解引发肥胖的白色脂肪，将后者转化成二氧化碳、水和热量，本身不储存热量。棕色脂肪组织呈棕色，其特点是组织中有丰富的毛细血管，脂肪细胞内散着许多小脂滴，线粒体大而丰富，核圆形，位于细胞中央，这种脂肪细胞也称为多泡脂肪细胞。棕色脂肪组织在成年动物极少，新生儿及冬眠动物较多，在新生儿主要分布在肩胛间区、腋窝及颈后部等处。棕色脂肪组织仅在婴儿时期发挥作用，它们堆积在新生儿肩胛处，帮助维持体温。随着年龄增长，棕色脂肪会逐渐消失。终，动物体内只残存少量棕色脂肪细胞，分布于颈部和锁骨。脂肪细胞分为白色脂肪细胞和褐色（棕色）脂肪细胞，常呈白色，在婴幼儿期大量增殖，到青春期数量达到，此后数量一般不再增加。细胞内含有大量富含脂肪的小泡，称为脂质泡，富含光面内质网。此外，还有一种褐色脂肪细胞，在动物体内主要存在于肩胛骨间、颈背部、腋窝、纵隔及肾脏周围，含有高度团缩的褐色脂肪，作用是将脂质分解产热，调节体内脂质比例。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠棕色脂肪采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的小鼠棕色脂肪经油红O染色检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

大鼠0酸烯醇式酸羧激酶1(PCK1)检测试剂盒 ，英文名： PCK1 ELISA Kit

Mouse hepatitis B virus e aibody (HBeAb) ELISA Kit 小鼠乙型肝e抗体(HBeAb)检测试剂盒

RatHaptoglobin,Hpt/HPELISAKIT 大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforGCELISAKit大鼠内源性糖皮质激素

细胞S转移酶(GSHST)总活性比色法定量检测试剂盒20次

RaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISAKit大鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)检测试剂盒规格：96T/48T

NP重组甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) Protein

PDGF-R-A 血小板源性生长因子受体-A(抗原 0.5mgPDGF-R-A 血小板源性生长因子受体-A(抗原)

CEACAM8重组人 CEACAM8 / CD66b 蛋白 Protein

FAM171B Protein Human 重组人 FAM171B / KIAA1946 蛋白

CD14 Protein Human 重组人 CD14 蛋白 (Fc 标签)

PDGF-R-A 血小板源性生长因子受体-A(抗原 0.5mgPDGF-R-A 血小板源性生长因子受体-A(抗原)

FAM171B Protein Human 重组人 FAM171B / KIAA1946 蛋白

NP重组甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) Protein

CD14 Protein Human 重组人 CD14 蛋白 (Fc 标签)

CEACAM8重组人 CEACAM8 / CD66b 蛋白 Protein

小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human growth regulated oncogene alpha / melanoma growth stimulating factor (GRO alpha/CXCL 人生长调节致癌基因α/黑素瘤生激因子(GROα/CXCL

Humanpyruvatedehydrogenase-E1,PDHE1ELISAKit 人酸脱轻酶E1(PDHE1)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanai-Qfeveraibody,ai-Q-Ab检测试剂盒人抗Q热抗体(ai-Q-Ab)检测试剂盒规格：96T/48T

植物释放凋亡检测试剂盒(含抗体)10次

Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3ELISAKit人坏死因子相关凋亡诱导配体3(AIL-R3)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠棕色脂肪细胞小鼠P物质受体(SP-R)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠P物质(SP)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠P53(P53-ab)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠p53(p53)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和尊龙凯时联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和尊龙凯时联系，告知细胞的具体情况，以便尊龙凯时的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。