产品名称:鸭胚成纤维细胞
产品特点:鸭胚成纤维细胞公司正在出售的产品人主动脉平滑肌细胞cDNAHASMC cDNA tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02-CAG-tTA-2D1 木瓜蛋白酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL 人脑瘤细胞;SF17 人肠平滑肌细胞(HISMC)RA, 大鼠星形胶质细胞 Rattus H125
产品型号:
更新日期:2024-12-17
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鸭胚成纤维细胞的详细资料:
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
细胞简介:
鸭胚成纤维分离自胚胎;成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的胚胎成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。该细胞常用作ES细胞培养常用的饲养层细胞,能产生抑制ES细胞自主分化和促进ES细胞增殖的因子,故能有效地促进ES细胞的增殖并维持其未分化特性和多潜能性,且分泌效果优于外源添加的一些因子,而且可以为ES细胞的培养提供类似于体内的微环境,故在研究哺乳动物ES细胞中得到广泛使用。
产品名称 | 鸭胚成纤维细胞 | 组织来源 | 胚胎 |
英文名称 | Duck Embryo Fibroblast Cells | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
方法简介:
实验室分离的鸭胚成纤维采用消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的鸭胚成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3-5代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
鸭胚成纤维体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和尊龙凯时联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm离心3 min,弃上清。加5 mL PBS重悬细胞,再900 rpm-1000 rpm离心3 min,,用新鲜的*培养基重悬细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和尊龙凯时联系,告知细胞的具体情况,以便尊龙凯时的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1:2传代 。
9.注意: 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。
公司正在出售的产品:
树突状细胞相关C型凝集素-1 英文名称: Human Dendritic cell Associated C type Lectin 1 英文缩写: Dectin 1
二氢二醇脱氢酶 英文名称: Human Dihydrodiol Dehydrogenas 2 英文缩写: DDH2
多巴胺 英文名称: Human Dopamine 英文缩写: DPN
强啡肽 英文名称: Human Dynorphin 英文缩写: DYN
FITC标记人CD11a单克隆抗体
DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase 0.5mgDRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase) 双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗原
IgG2 Protein Human 重组人 IgG2-Fc 蛋白 (257 Ser/Ala)
MME重组大鼠 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 Protein
CD36 Protein Mouse 重组小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白 (His & Fc 标签)
PRDX2重组人 Peroxiredoxin 2 / PRDX2 蛋白 Protein
豚鼠胰岛素样生长因子1(IGF1)试剂盒 ,英文名: IGF1 ELISA Kit
Human Mycoplasma pneumoniae aibody (MP-Ab) ELISA Kit 人肺支原体抗体(MP-Ab)试剂盒
rabbitmaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit 兔子基质金属蛋白酶9(MMP-9)pcr检测试剂盒分装
CLIAKitforBcl-2(MouseB-cellleukemia/lymphoma2)ELISAKIT小鼠B细胞淋巴瘤因子2
纤维蛋白溶酶(PLASMIN)活性荧光定量试剂盒20次
rabbitCoicosterone,COELISAKit兔子皮质同/肾上腺同(CO)试剂盒规格:96T/48T
鸭胚成纤维细胞大鼠内脂素(VF)试剂盒 ,英文名: VF ELISA Kit
Monkey ierferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit 猴α干扰素(IFN-α)试剂盒
RatcoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit 大鼠Ⅷ相关抗原(FⅧ-Ag)pcr检测试剂盒分装
CLIAKitforGlycoproteinVI(Human)ELISAKit人糖蛋白VI
细胞非蛋白/游离巯基含量比色法定量试剂盒20次
RatSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit大鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)试剂盒规格:96T/48T
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